一、引言:
三七是我国传统中药材是我国名贵中药材,也是云南独具特色的中药材资源,具有抗炎、止血、抗衰老、抗肿瘤等药理活性。三七用于治疗疾病有悠久的历史,在《本草纲目》以前的《医门秘旨》、《跌损妙方》中已有记载。皂苷是三七的主要有效成分之一,迄今为止,已从三七的不同部位(根、茎叶、花蕾、种子等)分离得到70余种单体皂苷。尽管三七中皂苷成分种类繁多,但主要成分仅有人参皂苷Rg1、Rb1、Rd、Re、三七皂苷R1等。其中人参皂苷Rg1、Rb1和三七皂苷R1在维持血液循环、改善心肌缺血、抗心律失常、抗休克、镇静、提高智力、抗衰老、抗氧化、抗细胞增殖和抗肿瘤等方面均显示出一定的药理作用。对于三七药材中主要皂苷成分和种类的检测对于三七药材的质量控制具有重要的意义。
《中华人民共和国药典》(2015年版一部)采用高效液相色谱法对于三七中皂苷成分进行分析,但是其分析时间很长(60min)。同时,药典中允许为了缩短分析时间、节约溶剂,可以使用更小填料粒径的色谱柱,并对相应的色谱柱参数进行调整。上海伍丰科学仪器有限公司通过相关软件对三七药典方法进行转化,实现了对三七中皂苷成分的快速检测。
二、仪器配置
1.高效液相色谱配置
LC-100二元高压梯度液相色谱仪;
紫外检测器;
Arcus 5自动进样器;
4.6*150mm,5μm C18色谱柱
2. 超快速液相色谱配置
EX 1700 超快速液相色谱仪;
紫外检测器;
Arcus 5自动进样器;
2.1*50mm,1.8μm C18色谱柱
三、检测条件
表1 三七皂苷的检测条件
仪器 | LC-100 | EX 1700 | ||
相同参数 | 柱温
检测波长 流动相组成 |
25℃
203nm (A)乙腈-(B)水 |
||
不同参数 | 色谱柱
流动相比例和梯度 流速 进样体积 |
C18 4.6*150mm, 5μm
0/12/60min 19/19/36(A%) 1ml/min 10uL |
C18 2.1*50mm, 1.8μm
0/1.4/14min 19/19/36(A%) 0.4ml/min 2uL |
备注:C18 150mm色谱柱为西班牙柱
四、谱图结果
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图1 LC-100液相色谱图(Rg1与Re的分离度为2.20)
图2 EX 1700 液相色谱图(Rg1与Re的分离度为2.16)
五、总结
在保证分离度的前提下,使用EX 1700可以实现三七中皂苷成分的快速检测。相比于普通的高效液相色谱分析来说,分析时间缩短到到原来的1/4左右,溶剂消耗量减小为原来的1/10左右。